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    胃癌是消化道最常見的腫瘤，淋巴結轉移是胃癌擴散的主要途徑，并且淋巴結轉移程度是影響胃癌患者預后的最主要因素之一。研究發現，在癌浸潤和轉移過程中，有很多步驟與癌細胞粘附性改變密切相關。E_鈣粘蛋白（E_cad是一種介導同種細胞互相粘附的鈣依賴性跨膜糖蛋白，是介導上皮細胞間粘附的最主要分子。E_cad已被認為在上皮源性惡性腫瘤的轉移過程中起重要作用。本研究利用免疫組化探討E_cad在胃癌浸潤與轉移中的作用。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料

    選取2004_01—2006_12汕頭大學醫學院第一附屬醫院有完整原發性胃癌手術切除標本的存檔蠟塊36例（男性32例，女性4例。年齡44～81歲，平均60.2歲。全部患者術前均未接受放、化療，并進行隨訪。病理組織分型：標本經病理證實為腺癌，其中低分化腺癌11例，高、中分化25例。采用國際抗癌聯盟1987年公布的胃癌TNM分期：Ⅰ期2例，Ⅱ期8例，Ⅲ期20例，Ⅳ期6例。其中有、無脈管侵犯分別為6和30例。有、無淋巴結轉移分別為24和12例。

    1.2 檢測方法

    手術標本常規福爾馬林固定，24h內取材，石蠟包埋，連續切片（厚4μm，蘇木精_伊紅染色。E_cad免疫組化染色。本實驗采用鏈霉素_生物素（S_P免疫組化技術，鼠抗人E_cad單克隆抗體：美國Maxim Biotech公司生產，購自福州邁新生物技術有限公司，按說明書操作。用已知的乳腺癌陽性片作陽性對照，同時用PBS替代一抗作陰性對照。根據細胞膜或胞漿的染色程度及染色細胞百分率進行判定：細胞膜或胞漿中有棕黃色顆粒沉著為陽性。基本不著色或著色細胞占計數細胞<5%為“_”，著色淡或著色細胞占5%～25%為“+”，著色深或著色細胞占26%～50%為“++”，著色細胞計數>50%為“+++”。

    1.3 統計學處理

    各樣本計數資料采用SPSS10.0軟件包統計處理，組間計數資料差異比較采用χ2檢驗。

    2 結果

    E_cad在癌旁組織及胃癌組織中的表達呈細胞漿分布，陽性信號為棕黃色顆粒。E_cad在胃癌組織中的陽性表達率（72.2%（26/36顯著低于癌旁組織（91.7%（33/36（P<0.05，表1。E_cad的陽性表達與胃癌分化程度顯著相關（P<0.05。但與腫瘤大小、部位、脈管侵犯、浸潤深度、淋巴結轉移、TNM分期等無相關。E_cad在高、中分化癌及低分化癌的陽性表達率分別為84.0%和45.5%，分化程度越高，表達越強。

    3 討論

    90%的腫瘤患者死于腫瘤轉移，故對轉移的研究一直是腫瘤研究的熱點。腫瘤浸潤轉移是腫瘤細胞與宿主間復雜、多步驟相互作用的結果，也是胃癌治療失敗和死亡的主要原因。研究表明，細胞粘附分子與腫瘤細胞的侵襲轉移行為密切相關，在腫瘤的發生、發展和轉移中起重要作用，同時也是預后評估的關鍵指標。E_cad是細胞膜上的一種跨膜糖蛋白，其參與組織形態的發生和形成、胚胎的發育和發展。對細胞的生物學行為影響主要是控制細胞的移動，促進細胞間發生粘附，其功能的發揮需要catenins和細胞骨架系統的聯合。

    近年來從分子水平對腫瘤細胞的粘附功能進行深入研究，顯示多種癌細胞或癌組織在癌癥早期常有E_cad表達減弱及功能障礙存在。E_cad普遍存在于各類上皮細胞，介導同型細胞連接，在維持正常上皮細胞形態，細胞極性及組織結構完整性中發揮重要作用，在正常細胞中E_cad表達穩定，但在癌細胞中表達則常不穩定，在多種上皮性腫瘤中E_cad表達下調。

    據報道，34.5%～72.0%胃癌E_cad表達減弱或消失，E_cad減少或缺失后，胃癌細胞間的粘附力減弱，易使癌細胞彌漫生長，不能形成腺管，容易脫落及向遠處轉移。多數研究揭示，人體惡性腫瘤細胞中的E_cad常呈不同程度低表達，低表達組比高表達組浸潤能力強，淋巴結轉移率和遠處轉移率高，生存率相對較低。本研究結果E_cad在胃癌組織中的陽性表達率為72.2%（26/36，癌旁組織為91.7%（33/36（P<0.05。因此，E_cad基因一般被認為是一種轉移抑制基因。

    在胃癌的臨床病理特征方面，E_cad表達與細胞分化程度亦有相關性。E_cad減少、喪失等使細胞間的粘附減弱，癌細胞易于分開而脫離原發灶，從而發生浸潤轉移。隨E_cad表達率的降低，從黏膜及下層發展到肌層漿膜層，浸潤深度不斷增加。有淋巴結轉移者，E_cad表達均明顯低于無淋巴結轉移者，因此E_cad表達程度與胃癌的浸潤轉移能力呈負相關。這間接證實了在實體腫瘤內，E_cad表達有助于誘導腫瘤細胞的分化，具有降低轉移發生率的作用。E_cad在發揮細胞粘附功能上起關鍵作用，兩者功能的破壞則是腫瘤細胞發生浸潤轉移的關鍵步驟之一。在正常胃黏膜組織中E_cad呈強陽性表達，在胃癌組織中不僅表達強度下降，而且陽性表達率也明顯下降，同時還顯示其表達強度和陽性表達率與腫瘤分化程度、浸潤深度以及淋巴結轉移密切相關，這提示了E_cad表達可能抑制腫瘤細胞的侵襲和轉移。

    侵及漿膜者E_cad蛋白減弱表達率明顯高于未侵及漿膜者，說明隨著浸潤深度的加深，E_cad減弱表達率升高，提示E_cad蛋白減弱表達可能與浸潤深度呈正相關。其機制可能是E_cad的減弱表達導致其介導的細胞_細胞間的粘附性降低，使腫瘤細胞得以脫離原發灶并獲得穿透基底膜而進入基質的能力。E_cad減弱表達可能與胃癌的淋巴結轉移有關，但其在淋巴結轉移的各個步驟中，具體到哪幾步起作用和起的作用究竟多大，目前還不清楚，有待進一步研究。我們的研究結果：E_cad的陽性表達與胃癌分化程度相關（P<0.05。但與腫瘤大小、部位、脈管侵犯、浸潤深度、淋巴結轉移、TNM分期等無相關。E_cad在高、中分化癌及低分化癌的陽性表達率分別為84.0%和45.5%，分化程度越高，表達越強。

    KARAYIANNAKIS等發現E_cad在87%的低分化腺癌、84%的印戒細胞癌和57%的高分化胃癌患者中僅顯示弱表達或不表達，其表達強度與腫瘤病理學分級呈負相關。總之，E_cad表達的差異與胃癌的發生發展、浸潤及轉移能力、組織結構完整性、正常腺體的分解和分化程度有較顯著的相關性。因此，E_cad可作為評價胃癌生物學特性較好的客觀指標之一。